PCR即聚合酶鏈式反應,是分子生物學研究和實驗的常規(guī)方法,也是生物學、醫(yī)學臨床等領域廣泛應用的實驗技術。其特點是能將微量的DNA大幅增加。實驗室分為四個區(qū)域,進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行,不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出,四區(qū)域分別為:1.試劑配制區(qū)2.樣品處理區(qū)3.核酸擴增區(qū)4.產物分析區(qū)如使用全自動分析儀,區(qū)域可適當合并設計要求:PCR實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。一、分散形式PCR實驗室所謂分散形式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室,由于各個實驗之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。二、組合形式PCR實驗室所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室,由于各個實驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間,以減少室內外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。如果使...
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按照BSL-2標準建造的實驗室,也稱為基礎生物實驗室。在建筑物中實驗室無需與一般區(qū)域隔離。實驗室人員需經一般生物專業(yè)訓練。其具體標準微生物操作、特殊操作、安全設備、實驗室設施要求如下。一、標準操作1.工作一般在桌面上進行,采用微生物的常規(guī)操作和特殊操作。2.工作區(qū)內禁止吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡和使用化妝品。食物貯藏在專門設計的工作區(qū)外的柜內或冰箱內。3.使用移液管吸取液體,禁止用嘴吸取。4.操作傳染性材料后要洗手,離開實驗室前脫掉手套并洗手。5.制定對利器的安全操作對策。6.所有操作均須小心,以減少實驗材料外溢、飛濺、產生氣溶膠。7.每天完成實驗后對工作臺面進行消毒。實驗材料濺出時,要用有效的消毒劑消毒。8.所有培養(yǎng)物和廢棄物在處理前都要用高壓蒸汽滅菌器消毒。消毒后的物品要放入牢固不漏的容器內,按照國家法規(guī)進行包裝,密閉傳出處理。9.昆蟲和嚙齒類動物的控制應參照其它有關規(guī)定進行。10.妥善保管菌、毒種,使用要經負責人批準并登記使用量。二、特殊操作1.操作傳染性材料的人員,由負責人指定。一般情況下受感染概率增加或受感染后后果嚴重的人不允許進入實驗室。例如免疫功能低下或缺陷的人受感染危險增加。2.負責人要告知工作人員工作中的潛在危險和所需的防護措施(如免疫接種),否則不能進入實驗室工作。3.操作病原微生物期間,在實驗室入口必須標記生物危險信號,其內容包括微生物種類、生物安全水平、...
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生物安全防護實驗室是指實驗室的結構和設施、安全操作規(guī)程、安全設備能夠確保工作人員在處理含有致病微生物及其毒素時,不受實驗對象侵染,周圍環(huán)境不受污染。根據微生物及其毒素的危害程度不同,分為4級,一級最低,四級最高。1系統(tǒng)要求和功能介紹1.1系統(tǒng)形式潔凈空調系統(tǒng)采用全新風系統(tǒng)??照{系統(tǒng)送、排風總管道上設置有電動密閉風閥,以利于實驗室熏蒸消毒時,保證實驗室的氣密性,防止泄漏。1.2送風系統(tǒng)采用組合式空調機組對室外新風進行初、中效過濾及熱、濕處理??照{機組設置兩臺同型號送風機,一用一備,以確保風機故障時可立即切換,保證實驗室的安全運行。加濕采用電極蒸汽加濕。初效過濾器過濾等級為G4,中效過濾器過濾等級為F7。新風口設置于空調機房的側墻上,采用防雨百葉風口,并設置金屬保護網,以防止昆蟲、鼠等動物進人。送風管道采用意大利進口P3風管,風管為鋁箔/聚胺脂復合板材,采用專用黏合劑粘接成型,保證優(yōu)良的氣密性及保溫隔熱性能。實驗室各房間的送風支管上設置風量調節(jié)器,以保證房間的設定送風量不會因送風高效過濾器積塵阻力變化而改變。房間高效送風口安裝國標B類高效過濾器,過濾效率9.99%,金屬邊框。靜壓箱采用鋼制整體焊接,表面噴塑防腐處理。采用孔板擴散罩送風口。1.3排風系統(tǒng)房間排風口在擺放生物安全柜側的隔墻.上單側布置,風口下邊沿距地面100mm高。以實現室內被污染風險最高的區(qū)域遠離房間入口。排風口安裝國標...
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一、無菌病房通風系統(tǒng)的確定(1)潔凈病房通風系統(tǒng)的劃分高級別無菌病房空調系統(tǒng)獨立設置。其原因是高級別手術室空調送風量大,同樣面積的無菌病房,百級的空調風量是萬級的10多倍;另外高級別無菌病房的使用頻率遠低于低級別手術室,這樣無論是一個空調系統(tǒng)負擔多個高級別無菌病房,或是一個空調系統(tǒng)負擔一個高級別無菌病房和多個低級無菌病房,都會使空調系統(tǒng)長時間處于“大馬拉小車”的運行狀態(tài)??紤]到無菌病房的特殊性,設計白天空調運轉時截面風速為0.25m/s,由于晚上病人睡覺時對房間風速和噪音要求較高,晚間空調運轉模式下設計截面風速為0.18m/s。為了防止在病房進行消毒或做產生有異味的氣流混合物的工作時,影響其它病房的病人,給病人的安全帶來隱患,防止病房間的交叉感染,從使用靈活性、可靠性和安全性考慮,兩間百級病房各設置獨立的循環(huán)組合機組,千級潔凈病房1.2.3供同樣病人使用,合用一個循環(huán)組合機組。千級病房4.5供同樣的病人使用,合用一個循環(huán)組合機組。從節(jié)能的方面考慮,每個循環(huán)組合機組都采用雙風機系統(tǒng),一臺為白天大風量運轉,一臺為晚間小風量運轉,且兩臺風機設置互為備用。當一臺損壞時另一臺自動迅速啟動并發(fā)出維修報警信號,保證室內的無菌環(huán)境。(2)潔凈走廊及輔助用房通風系統(tǒng)的確定中央清潔大廳、潔凈走廊、高級別于術間的準備區(qū)輔助用房等由一個單獨的空調系統(tǒng)負擔,目的是保證手術室外部空氣環(huán)境時時處于“臨戰(zhàn)”狀態(tài)。...
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一、布局設計層流病房由潔凈病房、醫(yī)療用房和輔助用房組成。設有層流病房的醫(yī)院,其院址選擇及層流病房在總體布局中的位置,均應考慮大氣環(huán)境。(一)布置特點潔凈護理單元布局為單獨布置和集中布置兩種方式。當與醫(yī)院其他潔凈度較高的部門(如重癥監(jiān)護單元、潔凈手術部等)集中布置時,應既能保證各部門之間的醫(yī)療聯系,又相對獨立,從而利于室內潔凈環(huán)境的持久。為了達到更高潔凈度的治療環(huán)境,可采用設置單向流潔凈倉的方式。按醫(yī)療上的聯系和對潔凈度要求的差異,潔凈護理單元的分區(qū)方式一般有條形分區(qū)與團形分區(qū),當條件允許時首先采用團形分區(qū)的方式。(二)潔污分流人、物流線組織應貫徹“潔污分流”的原則,布局設計時應采取“入口分流”或“內外廊分流”的措施?!叭肟诜至鳌?#160;即在單元入口處有效地控制、組織進人潔凈護理單元的各種人、物流線,各行其道?!皟韧饫确至鳌奔促N近病房區(qū)設置封閉式外廊作為探視廊,并配置污染流線(與樓梯連接還可兼做疏散通道),單元內廊僅配置潔凈流線。進入潔凈護理單元的人、物應采取有效的凈化程序,并設置一定數量的人員凈化用房和輔助用房。病房內的污物,宜經過傳遞窗至外廊運出,或者經清潔包裝后由內廊運出。潔凈區(qū)人口處應設置氣閘室。(三)病房內空間設計病房空間用色應舒緩宜人,病床對面的墻面上可設置壁掛電視,緩解患者煩躁不安的緊張情緒;靠探視走廊一側可設置探視窗,配內置式電動窗簾;病房內設置直接飲水點,方便患...
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潔凈手術室的凈化空調系統(tǒng)能有效控制手術室內細菌的濃度、溫濕度、塵埃數量,降低手術感染率。隨著醫(yī)學科學的迅猛發(fā)展,潔凈手術室已成為現代化醫(yī)院的標志。手術室是醫(yī)院感染控制的重點部門之一,潔凈技術僅能保證潔凈手術室空氣達到一定的潔凈度,并不能殺滅吸附于手術間物品表面或地面的細菌,無清潔消毒作用。因此,必須做好潔凈手術室的清潔和消毒工作,正確使用和嚴格管理整個凈化系統(tǒng),嚴密防止醫(yī)源性感染。一、手術室布局流程在手術室感染管理中,布局流程合理是首要問題,潔凈手術室要嚴格區(qū)分潔凈區(qū)與污染區(qū),通道走向合理,各通道門保持關閉狀態(tài),嚴格人物流走向,進入手術室人員必須更換一用一滅菌的手術衣,戴口罩帽子更換消毒拖鞋。嚴格參觀制度,限制非手術人員進入手術室內。二、手術室感染控制(1)手術室空氣是手術室感染途徑之一,細菌一般附著在灰塵上,如塵埃、棉制品上的纖毛或飛沫上隨氣流飛于空氣中,隨人的走動而流通于各處,人體表皮皮屑,呼吸排出二氧化碳及汗腺分泌物等,所以手術室應盡量使用產塵少的布類敷料及洗手衣褲。手術前開啟凈化系統(tǒng)術中持續(xù)凈化術后持續(xù)凈化30分鐘?;?4小時持續(xù)凈化。(2)保證手術室清潔衛(wèi)生,近年來醫(yī)院手術室工作以由保潔公司承擔,保潔公司對保潔員進行專業(yè)保潔培訓,對員工嚴格要求,保證手術室清潔衛(wèi)生到位。在此基礎上,手術室應對在手術室工作的保潔員進行手術室專業(yè)知識培訓,如無菌觀念,各區(qū)域區(qū)分,手術間術前術后...
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一、手術室空氣質量的影響因素手術室環(huán)境空氣潔凈度是劃分手術室等級的標準,其直接影響傷口愈合,是造成交叉感染的重要因素,所以應該對手術室內細菌進行有效控制,通過科學方法和嚴格的管理措施,以減少醫(yī)院感染率,確保病人的康復。影響手術室空氣質量的因素有:1.手術室外空氣中的細菌通常人們只注重對手術室內清潔和除菌,但手術室送風幾乎來自于外界,室外空氣直接影響了手術室內空氣質量的好壞,所以應該對送風源保持高度的重視,有效控制空氣質量的方式是凈化空氣技術,通過使用多級空氣過濾系統(tǒng),可以最大成都的去除空氣中的懸浮微粒和微生物,同時過濾器應該定期檢查及時更換。2.手術室內空氣中的細菌污染物的產生主要在手術室內,控制好室內細菌是提高清潔度的關鍵。由于障礙物阻塞干擾而導致空氣流通不暢是產生渦流滋生細菌的主要原因。大致可分為兩種:手術室照明燈、人體和產熱設備會產生局部熱通量,由此產生的渦流會污染手術區(qū);氣流會在儀器儀表,手術臺和其他設備的背風處產生渦流,如果消毒不徹底會導致細菌大量繁殖,增加空氣污染。另外,醫(yī)護人員的服裝也極易產生塵埃,服裝大多數是棉制品,醫(yī)院一般只進行例行清洗,而不消毒;還有,手術室工作人員及病人本身就是污染散發(fā)的源頭。二、氣流組織設計合理的氣流組織是以室內人體舒適度為要求,通過有效地布置送風口和回風口,使得經過處理的空氣與室內空氣混合消除空調區(qū)內的余熱和余濕,從而形成比較穩(wěn)定的溫濕度、...
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一、醫(yī)院潔凈室的使用要求手術室分級要求不同等級的潔凈手術室適用于不同的手術范圍。I級特別潔凈手術室:適用于關節(jié)置換手術、器官移植手術及腦外科、心臟外科、婦科等無菌手術;II 級標準潔凈手術室:適用于胸外科、整形外科、泌尿外科,肝膽胰外科、骨外科和普通外科中的一類無菌手術;III 級一般潔凈手術室:適用于普通外科(除去一類手術)、婦產科等手術;Iv級準潔凈手術室:適用于肛腸外科及污染類等手術。潔凈手術部輔助用房應包括潔凈輔助用房和非潔凈輔助用房,適用范圍如下。I級潔凈輔助用房:適用于生殖實驗室等需要無菌操作的特殊實驗室房間;II 級潔凈輸助用房:適用于體外循環(huán)灌注準備的房間;III 級潔凈輔助用房:適用于刷手,手術準備,無菌敷料與器械、一次性物品和精密儀器的存放房間,護士站以及潔凈走廊;Iv 級潔凈輔助用房:適用于恢復室、清潔走廊等準潔凈的場所。非潔凈輔助用房:適用于醫(yī)師和護士休息室、值班室、麻醉辦公室、冰凍切片室、暗室、教學用房及家屬等候處、換鞋和更外衣處、浴廁和凈化空調等設備用房等。二、醫(yī)院空氣潔凈室設計應遵循的原則(一)潔凈室凈化系統(tǒng)的基本要求:(1)潔凈室應遠離污染區(qū),周圍應有大片綠化草坪。(2)布局要合理,空氣潔凈度高的潔凈室宜靠近空調機房;潔凈度相同的工作室宜集中布置:靠近潔凈區(qū)入口處宜布置潔凈度等級低的工作間。潔凈室的面積和室內人員應限制在最少的程度。(3)合理確定各種...
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一、凈化空調系統(tǒng)概述凈化空調控制系統(tǒng)就是將室外空氣經過多級過濾處理和溫度、濕度控制送入室內并合理地組織室內的空氣流動,快速排除室內的有害物質及細菌,對室內潔凈程度、溫濕度和壓力進行控制的空調系統(tǒng)。凈化空調系統(tǒng)一般由空氣過濾系統(tǒng)、空氣熱、濕處理系統(tǒng)和送排風系統(tǒng)三大部分組成。P3實驗室對溫濕度、潔凈度和房間壓力有嚴格的要求,因此P3實驗室的空調系統(tǒng)就成為典型的凈化空調系統(tǒng)。由于動物實驗室進行的是能夠產生有害物質的實驗,這種房間的環(huán)境品質要求就非常高,首先環(huán)境必須達到一定的潔凈度和溫濕度要求以保證作為實驗對象菌類能夠正常存活,潔凈度或者溫濕度品質的微小變化都有可能造成菌類的死亡或者實驗過程的不可控,最終導致實驗的失敗。實驗室房間的具體功能決定了環(huán)境品質必須維持穩(wěn)定,需要高精度的溫濕度環(huán)境,并且具有較高的潔凈度要求,實驗室還有毒源,負壓和壓差梯度的控制要求,使得系統(tǒng)得運行管理工作難度增大,故對以上系統(tǒng)采用自動化控制系統(tǒng),利用計算機軟件和高精度的敏感元件,既可以提高系統(tǒng)的環(huán)境溫濕度精度,又可以提高管理效率和質量。二、凈化空調控制系統(tǒng)的設計依據和參數系統(tǒng)設計的依據就是《生物安全實驗室建筑技術規(guī)范》和《潔凈廠房設計規(guī)范》及設計院的暖通、電氣圖紙,二次深化設計的自控系統(tǒng)必須滿足生物安全三級實驗室的實驗功能要求以及實驗室內的溫濕度、壓差梯度、潔凈度、氣流組織等要求??刂茀等缦拢?)壓差參數:P3實...
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一、二噁英實驗室的通風設計二噁英類物質是痕量持久性環(huán)境有機污染物,是非常穩(wěn)定、難以降解的強致癌物質,具有生殖毒性免疫毒性和內分泌毒性,對人體機體代謝有很大影響。根據HJ/T 365- -2007《危險廢物(含醫(yī)療廢物)焚燒處置設施二噁英排放監(jiān)測技術規(guī)范》的要求,二噁英類分析實驗室屬于專用實驗室,應按照不同的功能劃分區(qū)域,嚴格區(qū)分樣品的前處理區(qū)和高分辨率色質聯機分析區(qū)。標準二噁英實驗室-般設有更衣間、樣品準備間、洗烘間、藥品儲藏間、高濃度樣品預處理間、低濃度樣品預處理間、樣品間儀器分析間、散熱器間、降解間、控制室、辦公室等功能房間。其中散熱器間,控制室辦公室和配電室在非潔凈區(qū),其他房間在潔凈區(qū)。二噁英實驗室各區(qū)域污染程度從高到低為:二噁英前處理室→儀器室→質譜室→高分辨質譜室→細胞培養(yǎng)室;潔凈度從高到低:細胞培養(yǎng)室→高分辨質譜室→質譜室→儀器室→二噁英前處理室。二噁英實驗室的大多數房間屬于潔凈區(qū),根據實驗室面積大小,設置2~3個全空氣凈化空調系統(tǒng)為宜。樣品前處理區(qū)宜采用全新風空調系統(tǒng)。對于帶回風的空調系統(tǒng)新風量的確定,研究認為不宜小于40 m3/(人●h)。如果房間設有排風柜等局部排風設施,新風量應滿足補風要求;如果房間無局部排風設施,采用2~3 h-1換氣次數計算新風量。二噁英實驗室氣流組織宜采用定向流上送下排(回)。送風口設于房間人口或人員活動區(qū)頂部,排(回)風口設于排風柜或污染...
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